Étude fonctionnelle de la nucléoline chez la souris - EPHE - École pratique des hautes études Access content directly
Master Thesis Year : 2016

Étude fonctionnelle de la nucléoline chez la souris

Abstract

La nucléoline (NCL) est une protéine ubiquitaire (noyau, nucléole, cytoplasme, membrane cellulaire), impliquée dans de nombreux processus cellulaires (transcription d’ADNr, biogenèse des ribosomes, maturation des ARNr, métabolisme des ARNm, etc.). L’inhibition expérimentale de l’expression de NCL entraîne l’arrêt de la prolifération et la mort cellulaire par apoptose. Bien que NCL soit largement étudiée au niveau fondamental et pour son implication dans de nombreuses pathologies (cancers, infections virales, syndromes neurodégénératifs), de très nombreuses questions restent en suspens. Le laboratoire a initié la création du premier modèle murin d’inactivation conditionnelle de Ncl. La présente étude vise à caractériser les effets de l’inactivation du Ncl par une stratégie Cre/loxP, chez l’adulte et au cours du développement. Une délétion dans les deux allèles du gène Ncl, induite de manière quasi ubiquitaire chez des souris adultes à l’aide d’une recombinase Cre activable, entraîne chez les souris, une diminution de l’expression de Ncl dans la plupart de leurs organes, une perte de poids très importante et une mort rapide. Nous n’avons pas pu déterminer le(s) mécanisme(s) menant à la mort. Par ailleurs, l’état hétérozygote induit chez l’adulte, semble dans nos conditions expérimentales, viable. Ces résultats indiquent un besoin différentiel de NCL au cours du développement et à l’âge adulte. Nous avons aussi étudié le rôle de NCL dans le développement en invalidant Ncl grâce au transgène Nestin-Cre exprimé fortement dans le système nerveux central. Il apparaît que seules les souris porteuses de la délétion à l’état mosaïque (Ncl+/fl/D) sont viables, tout en présentant une hypoplasie du cervelet et des défauts comportementaux sérieux. La transmission de NclD via la lignée germinale est rare. Les souris mutantes hétérozygotes se développent in utero mais meurent de façon périnatale. Les souris KO dans le système nerveux central se développent mais sont anencéphaliques et mort-nées. En conclusion, Ncl est vital chez l’adulte comme au cours du développement puisqu’aucun mutant NclD/D n’a été observé. Si les adultes survivent avec un seul allèle fonctionnel, cet état d’haploinsuffisance entraîne de sérieux troubles du développement.
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Dates and versions

hal-01548136 , version 1 (27-06-2017)

Identifiers

  • HAL Id : hal-01548136 , version 1

Cite

Hélène Delage. Étude fonctionnelle de la nucléoline chez la souris : Mise en place et caractérisation d’un modèle Knock-Out conditionnel. Sciences du Vivant [q-bio]. 2016. ⟨hal-01548136⟩
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